信息来源：互联网   发布时间：2023-09-07

单独评估了2.2毫克/升的BAP和激动素，然后再评估了2.2毫克/升的BAP + 0.2毫克/升的IBA的组合效果。

 

前言贝宁种质中以体外器官发生法进行腰果无菌苗批量繁殖的条件选择了来自温室内一个月大腰果苗的节间外植体和体外发芽的子叶结点单独评估了2.2毫克/升的BAP和激动素，然后再评估了2.2毫克/升的BAP + 0.2毫克/升的IBA的。

组合效果使用来自不同生长调节剂组合的子叶结点和腋芽，得到了腋芽增殖的反应然而，子叶结点表现出最佳效果当使用2.2毫克/升的BAP时，80％的外植体产生了大量增殖芽（5至8个）在含有150毫升椰子水的MS培养基上，新芽的生长良好（5.75 ± 0.12），长度为6.73 ± 0.3厘米。

在含有40克/升蔗糖的1/2 MS培养基上观察到了使用NAA（2.5毫克/升）+ IBA（2.5毫克/升）的组合进行生根的情况。

腰果产业：在全球的机遇与挑战Anacardium occidentale是全世界的战略性产品腰果是一种在国际市场上需求日益增长的出口产品腰果在整个价值链中提供经济机会通过当地加工，它为生产国家的工业发展

提供了相当大的潜力全球腰果贸易超过20亿美元，并且需求还在增加在全球供应的总量中，有11万吨在国际市场上进行交易：印度（60％）和巴西（31％）是主要的出口国在雨量非常低的地区，腰果的幼叶是可食用的腰果木材非常有价值，它相当坚硬，密度约为500公斤/立方米，被用作

木材、薪材和制造木炭树皮和叶子被用于民间草药腰果叶和树皮具有杀菌作用腰果果壳产生的树脂对某些害虫具有有趣的生物学特性腰果产业正在成为一个汇聚各方能量的行业但作为商品链，如果非洲只充当原材料的生产角色，它将无法。

实现发展。在坦桑尼亚建立了第一个多克隆田，第二个在莫桑比克，第三个在贝宁。多克隆种子的开发是一种资产。这种技术也需要现代植物生物技术的技巧。

微繁殖可以用于生产克隆根砧，并更快地繁殖株微接枝后难以完全恢复其根发育能力，腰果嫩枝的根发育率非常低，需要经过4至6次连续嫁接才能成功恢复年轻状态第二种植物生物技术技巧——通过发生的微繁殖用于种子繁殖这增加了嫁接苗的供应（潜在用途是作为“复壮”芽材的克隆微繁殖的来源），并且绕过了嫁接的

根发育困难通过体外培养的生物技术将允许大规模地繁殖各种优良基因型，以便获得每个基因型的大量副本，从而构建高产果园贝宁腰果的仁重（内核产量KOR值）介于47至49磅之间，因其卓越的品质和口感而享有全球声誉。

和其他漆树科植物一样，腰果也有许多微繁殖的限制。体外培养腰果的主要限制之一是由于采收器官造成的次生代谢产物大量产生。

这些化合物的氧化会导致培养基中的组织变褐和坏死高水平的消毒要求使得野外采集的试验植物难以存活这些记录了栽培植物的茎尖和节间试验植物的存活率分别为3％和25％大多数在消毒后存活的试验植物在培养20天后变成褐色或坏死。

在许多情况下，来自成熟树木的微繁殖试验植物会受到过度污染的影响.来自体外萌发幼苗的试验植物最适合于腰果优良树木的微繁殖。尽管已经存在腰果体外再生的方案，但在贝宁还没有关于当地腰果品种的体外培养。

培养外植体和生长条件在无菌层流罩下，从4周大的离体苗中准备外植体将离体苗小心地从培养瓶中取出，放入一个大的无菌培养皿（直径14.5厘米）取下茎尖和子叶结点（长约2.5-3.0厘米）通过舍弃根部并在子叶结点交接处两侧。

保留约0.5-1.0厘米的胚轴和胚芽部分，获得带有或不带宽子叶的子叶结点外植体生长点启动培养基包含改良的MS培养基（四分之三的宏量元素，完整的微量元素，维生素），添加3%蔗糖、0.2%活性炭（AC），并用2.25克/升植物凝胶（Sigma）凝胶化。

在高压灭菌前将培养基的pH调整为5.8，然后在121摄氏度下高压灭菌20分钟灭菌后的培养基装入100毫升试管中，每管加入15毫升培养基。

培养在25摄氏度±2摄氏度的培养室中，光照为16小时/天最初的三周，提供低光强度（16微摩尔∙平方米∙秒-1）随后，增加光照强度（45-55微摩尔∙平方米∙秒-1），使用荧光灯（飞利浦，40瓦）提供光照。

腋芽增殖进行于含有改良MS（3/4）的增殖培养基上，添加3%蔗糖和25毫克/升半胱氨酸评估了2.2毫克/升的BAP和激动素单独或与0.2毫克/升的AIB组合在一起的效果培养基用8克/升琼脂凝胶化四周后，将培养物转移到不含生长调节剂的MS/2培养基上。

通过计数，在四周和十周时评估腋芽的数量和形成的新芽数量生长于传代培养基上的腋芽被移至不含生长调节剂、添加0.2%活性炭和400毫克/升谷氨酰胺的MS/2培养基上，用于生长叶状新枝接种的培养物保持在25摄氏度±2摄氏度的条件下，白色荧光管灯。

提供16小时的光照。

测试了150毫升椰子水的效果多个生长中的新芽分成两个独立的集群，每隔三周生长一次在每次移栽时，收获较长的新芽，剩余的芽放回相同的培养基中继续生长十周后，用图纸测量新芽的长度生长超过2厘米的微型生长体在含有25毫克/升半胱氨酸和4%蔗糖的MS/2培养基上进行生根。

使用NAA和IBA的组合（各2.5毫克/升）将培养物放在光照下一旦出现根的初期，将其转移到不含生长调节剂、含有1克/升活性炭的液体MS/2培养基上，并在滤纸上放置灭菌前将培养基的pH调整为5.8±0.1。

对于腋芽增殖，分别在四周和十周时计数腋芽的数量和形成的新芽数量对于伸长，十周后用图纸测量新芽的长度在开始生根后15周，评估形成的根的数量腋芽、新芽和根的数量进行三因素方差分析（培养基、外植体类型、时间）。

为了得到正态分布（ANOVA假设），计数数据（腋芽数量、新芽数量、根数量）被转换为log10(n) ，其中n为真实值新芽生长也进行了三因素方差分析（培养基、外植体类型、时间）这些分析使用SAS软件（Statistical Analysis System Version 9.2）的PROC GLM过程进行。

使用Student Newman-Keuls检验在5%的显著性水平下分离均值。存活率因试验植物类型和培养基的不同而有所变化。

在含有两种细胞分裂素（2.2毫克/升BAP + 0.2毫克/升IBA）的培养基M3上培养的体外萌发的子叶节点获得了高达90％的存活率在无生长调节剂的培养基上，芽开始在三周内生长，腋芽膨胀并变绿）对于腰果芽数、枝条数和根数随着。

生长基质、试验植物类型和时间的变化进行了方差分析中列出了生长基质、试验植物类型和时间对芽数、枝条数和根数（平均值±标准误差）的影响芽数受到生长基质、试验植物类型和时间的显著影响（p < 0.001）枝条数受到生长基质和时间的显著影响（p < 0.05和p 0.05）。

这些因素之间的相互作用对于芽数、枝条数或根数均没有显著影响（p > 0.05）。从表3中可以看出，在节点轴周围开始出现几个腋芽，并且不断增殖。

腋芽的出现从第一次生长开始就能观察到腋芽的数量在每个生长周期中从1到12个不等，平均为4-5个/周期M1培养基中，BAP浓度为2.2毫克/升，配合体外萌发的子叶节点，可获得较多的腋芽（4.56 ± 0.09个）、枝条（4.19 ± 0.06个）。

10周后，观察到枝条的伸长频率为70％-80％根据生长基质、试验植物类型和时间对枝条长度的方差分析（ANOVA），后者（生长基质、试验植物类型、时间）以及生长基质时间的相互作用对枝条的伸长有非常显著的影响（p < 0.001）。

含有150毫升椰子水的E2培养基是最好的培养基，平均长度为4.35 ± 0.24厘米体外萌发的子叶节点被证明是最适合微繁殖的试验植物（p < 0.05），平均长度为5.37 ± 0.29厘米根的形成数量有所不同（每个周期1-4个）但大部分根有。

1-2个突出的根，平均长度为4厘米。根的生根百分比为20％-30％。减少盐浓度和增加蔗糖浓度有利于生根。从体外萌发的子叶节点收获的枝条显示出更高的生根百分比。

腰果生长中的关键发现在含有150毫升椰子水和2.2毫克/升BAP的MS培养基上，80％的试验植物对芽的增殖作出了良好的响应，每个试验植物产生了12-15个芽（5.75±0.12），并且有良好的茎长（6.73±0.3厘米）。

通过子叶节点获得的较多芽数可能是因为子叶节点具有较大的分生组织区域，而节间试验植物的这个区域较小为了优化生根反应，使用NAA（2.5毫克/升）+ IBA（2.5毫克/升）的组合在含有40克/升蔗糖的1/2 MS培养基上。

降低MS培养基中的矿物元素浓度并增加蔗糖浓度对于腰果的生根过程至关重要降低培养基中的矿物质浓度会导致培养基营养资源的减少高浓度的蔗糖会产生高渗压，从而减少从基部向地上部分运输水分和营养物质的能力将MS培养基中的矿物元素浓度降低，同时增加生长基质中

蔗糖的含量，从而减少叶器官的营养元素，将导致矿物质应激。叶茎为了应对这种应激状态，会产生根。的作者还报道了通过降低培养基中养分浓度诱导根的情况。

结论使用腰果离体苗作为外植体进行体外器官发生，以进行无菌微繁殖嫁接植物作为“重新激活”的芽材料在快速无菌微繁殖中具有潜力，可作为优势子叶结点在存在2.2毫克/升的BAP时表现出较好的增殖率添加150毫升椰子水有利于。

新芽的伸长。通过降低盐浓度、增加蔗糖浓度，并使用液体培养基，可以获得最佳的生根率。这些发现为腰果的快速繁殖和大规模生产提供了有效的技术支持。

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